1、DNA提取磁珠簡(jiǎn)介

       DNA提取磁珠屬于生物磁珠的一種，其中心為氧化鐵內(nèi)核，中層包裹封閉基質(zhì)，外層修飾官能團(tuán)。應(yīng)用于DNA吸附與提取純化的領(lǐng)域，具有一些重要的參數(shù)要求，如半沉降時(shí)間，磁吸時(shí)間，粒徑，比表面積，表面官能團(tuán)密度等。參數(shù)的差異不僅會(huì)導(dǎo)致操作復(fù)雜程度的不同，更會(huì)導(dǎo)致提取結(jié)果的不同，所以更要注重參數(shù)的區(qū)別，以下4種參數(shù)是選擇DNA提取磁珠的有效參考。

2、懸浮性

      磁性微球能夠均勻分散在液體中，跟隨液相進(jìn)入實(shí)驗(yàn)體系，但畢竟還是固體，會(huì)在液體中以一定速度沉降。所以DNA提取磁珠的半沉降時(shí)間應(yīng)在2min以上，才能保證加入磁珠時(shí)不會(huì)因?yàn)槌两颠^(guò)快而導(dǎo)致加入量不準(zhǔn)確，如果是多樣本的操作，對(duì)磁珠的半沉降時(shí)間要求應(yīng)該更高。吉恩特生物的DNA提取磁珠，01系列磁珠半沉降時(shí)間可達(dá)35-45min，02系列磁珠半沉降時(shí)間也在8-13min，良好的懸浮性，可以在操作過(guò)程中不用頻繁混勻磁珠，方便快捷的同時(shí)增加了實(shí)驗(yàn)的穩(wěn)定性和均一性。

3、磁吸時(shí)間

       DNA提取磁珠攜帶目的DNA與體系中雜質(zhì)分離的過(guò)程，主要是通過(guò)外加磁場(chǎng)使磁珠定向移動(dòng)并達(dá)到固液分離的目的，所以磁珠的磁吸時(shí)間會(huì)影響固液分離的時(shí)間，有些品牌的磁珠磁吸速度特別慢，這就影響了整體實(shí)驗(yàn)效率。吉恩特生物的DNA提取磁珠，磁吸時(shí)間均小于30s，02系列磁珠可達(dá)到磁吸時(shí)間小于5s。適應(yīng)手動(dòng)和儀器操作進(jìn)行核酸純化的實(shí)驗(yàn)頻率。

4、比表面積

       部分使用DNA提取磁珠的實(shí)驗(yàn)人員認(rèn)為粒徑越小的磁珠比表面積越大吸附效果也越好，這種想法并不完全正確。因?yàn)榇胖楸砻娌⒉皇枪饣秸那蛎妫窃谥虚g基質(zhì)層有孔洞，外圍修飾集團(tuán)有凸起的，比表面積并不由粒徑大小決定，而且也并不是比表面積越大吸附效果就越好的。有研究表明，當(dāng)比表面積在60m²/g時(shí)，對(duì)核酸的吸附效果較好。粒徑在300nm左右的磁珠包被基質(zhì)層薄內(nèi)陷孔洞少，孔容孔徑低；粒徑在1um左右的磁珠包被基質(zhì)層厚，表面有大量孔洞，兩者比表面積都可以達(dá)到60m²/g左右。

4、官能基團(tuán)

       一般認(rèn)為DNA提取磁珠表面官能團(tuán)能越密集，對(duì)DNA的吸附效果越好，但考慮到空間位阻、電荷斥力，過(guò)高濃度使官能團(tuán)陷入磁珠內(nèi)部等原因，DNA提取磁珠的表面官能團(tuán)數(shù)量并不是越多越好的。適當(dāng)?shù)慕档痛胖樯a(chǎn)過(guò)程中官能團(tuán)修飾原料，可以很好的控制DNA提取磁珠的粒徑和吸附量平衡。

5、結(jié)語(yǔ)

      除了磁珠本身的性質(zhì)之外，提取純化DNA的過(guò)程中，使用的試劑體系也要和DNA提取磁珠相匹配，能夠提取DNA的磁珠種類很多樣，不僅包被的中層基質(zhì)可能不同，表面修飾的官能團(tuán)也并不盡相同，不同磁珠適用的試劑體系是有區(qū)別的，吸附原理也不同，需要使用者根據(jù)具體情況進(jìn)行不同的調(diào)整和測(cè)試。

       面對(duì)不同的磁珠產(chǎn)品，選擇標(biāo)準(zhǔn)的DNA提取磁珠生產(chǎn)廠家，是效率高的方法。