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          核酸提取磁珠在病毒提取中的性能驗證

          作者: 發(fā)布時間:2022-10-11 瀏覽次數(shù):7102
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          核酸提取磁珠是生物磁珠的一種,洛陽吉恩特生物科技有限公司自主制備的核酸提取磁珠是具有自主知識產(chǎn)權(quán)的納米磁性生物微球,具有懸浮時間長、磁響應(yīng)速度快、核酸吸附效率高等特點,目前已廣泛應(yīng)用于各類樣本的DNA、RNA提取,對于血清、拭子等核酸含量較低的樣本,GNT-1系列磁珠具有較高的靈敏度,且通用性良好,可與各類主流試劑和主流儀器匹配,提取結(jié)果可直接用于下游檢測,實現(xiàn)高通量的自動化操作。


          ■材料與方法

          試劑:GNT-S04 病毒DNA/RNA提取試劑

          磁珠:GNT系列 核酸提取磁珠

          核酸提取儀:GNT32

          熒光定量PCR儀:宏石 SLAN-96P


          1、線性關(guān)系

          分別對105IU/ml、104IU/ml、103IU/ml、102IU/ml的HBV進行提取,線性關(guān)系良好。

          編號   標(biāo)本濃度   標(biāo)本用量   Ct值

          1      105 IU/ml    50ul        27.87

          2                                         27.95

          3     104 IU/ml     50ul        31.32

          4                                        31.22

          5     103 IU/ml     50ul       34.16

          6                                       34.34

          7     102 IU/ml     50ul      36.83

          8                                      37.02

          blob.png


          2、磁珠靈敏度

          分別對103 IU/ml、102 IU/ml的HBV進行提取,結(jié)果顯示,當(dāng)標(biāo)本投入量為50ul  103IU/ml的HBV時,檢測效率仍能保持穩(wěn)定。

          編號  標(biāo)本濃度  標(biāo)本用量  Ct值

          1      103 IU/ml   50ul      34.41

          2                                     34.49

          3                                     34.52

          4                                     34.31

          5      102 IU/ml  50ul      37.22

          6                                     36.85

          7                                     37.16

          8                                     38.67

          blob.png


          3、批次穩(wěn)定性

          選取8個不同批次的核酸提取磁珠,對HBV 進行提取,考慮到人工操作環(huán)節(jié)以及核酸提取儀本身的穩(wěn)定性,認(rèn)為不同批次的磁珠,提取結(jié)果一致,穩(wěn)定性較好。

          編號  磁珠批號    標(biāo)本濃度與用量      Ct值

          1     20201208  10IU/ml、50ul    35.26

          2     20210114                                35.33

          3     20210208                                35.30

          4     20210329                                35.51

          5     20210416                                35.09

          6     20210507                                34.92

          7     20210609                                35.00

          8     20210720                                35.17

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          4、磁珠凍融測試

          對磁珠進行-20℃的反復(fù)凍融測試,結(jié)果顯示,磁珠凍融后,提取效率差異不明顯,但出于對實驗結(jié)果穩(wěn)定性的考慮,盡量不要對磁珠進行凍融,或盡可能減少凍融次數(shù)。

          編號  凍融次數(shù)  標(biāo)本濃度與用量       Ct值

          1       未凍融    103 IU/ml、50ul     35.55

          2                                                    35.68

          3      凍融一次                                35.62

          4                                                   35.96

          5      凍融二次                               35.89

          6                                                   36.18

          7      凍融三次                               36.16

          8                                                   36.01

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          5、磁珠用量測試

          對同一HBV 標(biāo)本進行不同磁珠使用量的測試,結(jié)果顯示,10ul磁珠用量即可滿足實驗要求,磁珠用量過多,反而可能會降低提取效率,建議使用適量的磁珠進行核酸提取。

          編號  磁珠用量    標(biāo)本濃度與用量       Ct值

          1        10ul        10IU/ml、50ul    35.07

          2                                                    35.04

          3        15ul                                     35.07

          4                                                    35.36

          5        20ul                                     35.22

          6                                                    35.36

          7        25ul                                     35.53

          8                                                    35.45

          blob.png


          6、磁珠效期測試

          對保存24個月的磁珠進行HBV提取,測試磁珠的有效期,結(jié)果顯示,磁珠室溫(洛陽地區(qū)全年室溫在2-33℃左右)存放24個月后,提取效率保持一致。

          編號  磁珠批號   標(biāo)本濃度與用量     Ct值

          1     20210826  103 IU/ml50ul     34.50

          2                                                  34.33

          3                                                  34.50

          4                                                  34.53

          5    20190807                              35.02

          6                                                  34.89

          7                                                  34.73

          8                                                  35.10

          blob.png


          7、磁珠儲存條件測試

          將磁珠分別保存于GNT 保存液中、無水乙醇中、異丙醇中、胍鹽溶液中,并進行磁珠儲存條件的測試。結(jié)果顯示,磁珠在保存液中、無水乙醇中、異丙醇中均可以較穩(wěn)定的儲存,保存于胍鹽溶液中的磁珠,對提取效率有較明顯的影響,建議在對磁珠進行封裝保存時,選擇合適的試劑。

          編號  儲存條件     標(biāo)本濃度與用量   Ct值

          1    GNT保存液   103 IU/ml、50ul      35.41

          2                                                        35.52

          3      無水乙醇                                    35.46

          4                                                        35.65

          5      異丙醇                                        35.73

          6                                                        35.42

          7     胍鹽溶液                                      36.18

          8                                                        36.62

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          作為核酸提取磁珠的生產(chǎn)廠家,吉恩特生物會持續(xù)對產(chǎn)品進行檢驗,歡迎朋友們提出寶貴建議,我們會進行測試并反饋。

          ■訂購信息

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